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本試劑盒采用直(zhi)接(jie)競爭ELISA方法批量檢測禽(qin)白血病病毒抗原。

二、用途

批量檢測蛋清(qing)、泄殖腔式子、肝(gan)臟、病毒(du)培(pei)養(yang)液(ye)等一批中禽白血(xue)病病毒(du)，檢測結果可用(yong)于(yu)ALV感染的輔(fu)助診斷。

三、所需材料

儀器：微(wei)孔板酶(mei)標儀450 nm/630 nm、振蕩器、離(li)心機、、離(li)心管（5 mL, 50 mL）

微(wei)量移(yi)液器：單道 1µL～10 µL、10 µL～100µL

多道 50µL～300µL

試劑：去離子水

五、 試劑盒組成

六、溶液配制

配液1: 洗(xi)滌工(gong)作液

   用去離(li)子水將(jiang)20×濃縮洗滌(di)(di)液(ye)(ye)按1 : 19體積比進行稀(xi)釋(shi)，用于酶標(biao)板的洗滌(di)(di)，洗滌(di)(di)工(gong)作液(ye)(ye)在(zai)4℃環境可(ke)保存一(yi)個(ge)月，用前一(yi)天取出回溫。

 配(pei)液(ye)(ye)2: 1 ×樣品稀釋液(ye)(ye)        

   用(yong)去離子(zi)水將2 ×樣品(pin)稀釋(shi)液按1:1體(ti)積比進行(xing)稀釋(shi)。配好的(de)1 ×樣品(pin)稀釋(shi)液在4℃環境可保(bao)存(cun)一個月，用(yong)前一天取出(chu)回溫。

七、樣本前處理                                                   

樣本處理前須知：

① 處理完的(de)樣品應及時進行下步檢測，實驗中必須使用一(yi)次性吸(xi)頭，吸(xi)取不同試劑時要(yao)更(geng)換吸(xi)頭。

② 樣(yang)本數(shu)目(mu)超過8個時推薦使用排槍加樣(yang)。

樣本處理：

①蛋清(qing)取全蛋，破碎后取蛋清(qing)，,置-20℃以下凍融1次(ci)，用微量移(yi)液器吸取蛋清(qing)直接(jie)進行檢測。

②泄(xie)殖(zhi)腔拭子用無菌棉(mian)(mian)簽于待檢雞只(zhi)泄(xie)殖(zhi)腔取樣后(hou)，放入0.5ml 1×樣品(pin)稀釋液中，置-20℃以(yi)(yi)下凍(dong)融1次(ci)，劇烈震蕩1分(fen)鐘，擠出(chu)棉(mian)(mian)簽中的液體，棄棉(mian)(mian)簽。以(yi)(yi)5000r/min離心5分(fen)鐘，取上清直接進行檢測。

③病毒(du)培(pei)養(yang)液(ye)，取病毒(du)培(pei)養(yang)液(ye)以8000r/min離心10分(fen)鐘，取上清直接進行檢(jian)測(ce)。

④肝(gan)臟等組織，取約2g加入0.5ml 1×樣品稀釋液(ye)，研(yan)磨破碎，置-20℃以下凍融1次，以5000r/min離心5分鐘(zhong)，取上清(qing)直接進行檢測。

八、 酶標免疫測定程序

①將所有所需試劑從冷(leng)藏環境中(zhong)取(qu)出，待其(qi)完全回(hui)升至室溫(20~25℃)后方(fang)可使用(yong)。注意每種液體試劑使用(yong)前均須(xu)搖勻。

② 按陽性對照和樣品雙孔(kong)平行的數(shu)量使用(yong)微孔(kong)。

包(bao)被板上對照品和待測樣品添加如(ru)下所示：

(注：P表(biao)(biao)示陽(yang)性對照(zhao)品(pin);N表(biao)(biao)示陰(yin)性對照(zhao)品(pin)；S1、S2、S3、S4等表(biao)(biao)示待檢樣(yang)品(pin))