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本試劑盒采用(yong)酶聯免疫(yi)(yi)吸附(fu)試驗檢測(ce)豬血清(qing)中PRRSV抗(kang)體，用(yong)于(yu)免疫(yi)(yi)疫(yi)(yi)苗后抗(kang)體動態水平監測(ce)，指導免疫(yi)(yi)預防工作，評(ping)估豬場藍耳病(bing)(bing)免疫(yi)(yi)狀(zhuang)況，也可用(yong)于(yu)藍耳病(bing)(bing)的流行病(bing)(bing)學(xue)調(diao)查。

【產品內容】

【成分性狀】 

【用法與判定】 按以下步驟進行(xing)：

1、需要自備的器材

1.1 微量移液器(qi)；

1.2 微(wei)量移液器配(pei)套使用的槍頭；

1.3 用來稀(xi)釋洗滌液(ye)的(de)500ml量筒；

1.4 適用于檢測96T微孔(kong)板的(de)酶標儀(yi)；

1.5 用于稀釋樣品的1.5ml Ep管；

1.6 蒸餾水(shui)或去(qu)離子(zi)水(shui)。

2、樣品的制備 

用樣品稀釋液將待檢血清樣品進行50倍稀釋(建議：4μl血清樣品加入196μl樣品稀釋液中)，樣品加入包被板前要充分混勻，稀釋不同待檢樣品注意更換槍頭。注意：①制備血清用的血液樣本應無溶血現象發生；②不能稀釋陰性、陽性對照。

3、操作步驟 （﹡使用前應輕輕旋轉或震蕩予以混勻，所有試劑應恢復至室溫）

3.1  在A1和A2孔中分(fen)別加入100μl陰性對照；

3.2  在A3和A4孔(kong)中分別加入100μl陽性(xing)對照；

3.3  取(qu)100μl稀釋好的(de)待(dai)檢樣(yang)品加入相應孔中，并做好記錄；

3.4  37℃孵育30min；

3.5  將各孔的液體棄入廢液桶，每孔加250μl的洗滌液（試劑盒內20×濃縮洗滌液需用蒸餾水或去離子水稀釋后方可使用。如有結晶，需先溶解后，方可進行稀釋）進行洗板，重(zhong)復5次(ci)，每(mei)次(ci)30s；

﹡加液(ye)時防止各孔間洗(xi)(xi)滌(di)液(ye)串流(liu)影響檢測結(jie)果，盡量(liang)將孔內洗(xi)(xi)滌(di)液(ye)拋甩干凈；

3.6  每孔加100μl酶標結合(he)物；

3.7  37℃孵育(yu)30min；重復步(bu)驟3.5；

3.8  每孔加100μl底物(wu)液(ye)；

3.9  37℃孵育10min（避光顯色）；

3.10  每孔加(jia)50μl的終止液；

3.11  立刻于450nm波長處測定各孔的吸光度值，即OD₄₅₀值。

4、試驗有效性判斷

4.1陰性對照：正常情況下，陰性對照孔OD₄₅₀值≤0.3；

4.2陽性對照：正常情況下，陽性對照孔OD₄₅₀值≥0.6；

4.3臨界值(C.O.)計算：臨界值=0.18+陰性對照均值；陰性對照OD₄₅₀值大于0.3時應舍棄，如所有陰性對照OD₄₅₀值均大于(yu)0.3時須重復實驗；陰性(xing)對照低于(yu)0.05時以0.05計算。

4.4結果判定： 檢測樣品OD₄₅₀值≥臨界值，判定該檢測樣品為陽性； 檢測樣品OD₄₅₀值＜臨界值，判定該檢測樣品為(wei)陰性。

【注意事項】

（1）待檢血(xue)清(qing)樣(yang)品數量過多時，應(ying)先使用血(xue)清(qing)稀(xi)釋板(ban)將所(suo)有待檢血(xue)清(qing)稀(xi)釋完畢后，再統(tong)一將血(xue)清(qing)樣(yang)品加入酶標(biao)板(ban)中，使反應(ying)時間一致。

（2）試(shi)劑盒使(shi)用的(de)過程中不要吸煙、喝水(shui)和吃東西。

（3）底物液(ye)和終止液(ye)對(dui)皮膚有刺激性，注意防護。

（4）底物(wu)液(ye)不(bu)要暴露(lu)于(yu)強(qiang)光和任何氧化劑；使用(yong)潔凈的玻璃和朔料容器處理底物(wu)液(ye)。

（5）所有試(shi)劑(ji)應在2～8℃存放；使(shi)用(yong)前恢復到室溫，使(shi)用(yong)后放回2～8℃。

（6）注(zhu)意(yi)防止試劑盒組分受到污(wu)染。

（7）不(bu)(bu)要(yao)(yao)使(shi)用超過有效期的試(shi)劑，不(bu)(bu)同批次試(shi)劑盒的組分不(bu)(bu)要(yao)(yao)混(hun)用。

（8）操作過程中的移液、時間和洗滌必須精確。

【規格與包裝】96T×2

【貯藏與有效期】2～8℃避光保存，有效期(qi)為12個(ge)月